实用肿瘤杂志

2010, v.25(05) 523-527

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APE1shRNA重组质粒的构建及对人乳腺癌细胞生长的影响
Construction of APE1 gene specific short hairpin RNA expressing plasmid and effect on growth of human breast carcinoma cell

王忱;多健;史玉荣;佟仲生;

摘要(Abstract):

目的设计构建靶向脱嘌呤脱嘧啶核酸内切酶1(APE1/ref-1)特异性短发卡RNA的真核表达载体,并转染人乳腺癌T47D细胞。方法设计、合成针对APE1的特异性的短链寡核苷酸,构建APE1特异性shRNA的重组质粒,稳定转染人乳腺癌T47D细胞;采用聚合酶链反应和免疫印迹法检测转染前后T47D细胞中APE1的表达。采用四甲基偶氮唑盐法观察T47D细胞的生长情况。结果经酶切和测序鉴定,成功构建APE1特异性shRNA的重组质粒,并能够转染T47D细胞。转染后,APE1在mRNA和蛋白水平表达分别下降约53.1%和60.5%,T47D细胞增殖活性受到抑制。结论运用pGenesil-1.1质粒载体构建的靶向APE1特异性shRNA的重组质粒可以成功转染T47D细胞,有效抑制APE1的表达,并抑制肿瘤细胞的生长。

关键词(KeyWords): 乳腺肿瘤;RNA,短发卡;脱嘌呤脱嘧啶核苷酸内切酶1;基因表达;逆转录聚合酶链反应;免疫印迹法

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 天津市应用基础及前沿技术研究计划(08JCYBJC05500)

作者(Author): 王忱;多健;史玉荣;佟仲生;

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DOI: 10.13267/j.cnki.syzlzz.2010.05.007

参考文献(References):

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